原子力顯微鏡膠體探針是一種以物理學原理為基礎,通過掃描探針與樣品表面原子相互作用而成像的新型表面分析儀器。一般原子力顯微鏡利用探針對樣品掃描,探針固定在對探針與樣品表面作用力極敏感的微懸臂上。懸臂受力偏折會引起由激光源發(fā)出的激光束經(jīng)懸臂反射后發(fā)生位移。檢測器接受反射光,接受信號經(jīng)過計算機系統(tǒng)采集、處理、形成樣品表面形貌圖像。
原子力顯微鏡膠體探針選擇的原因:
1利用AFM檢測細胞的力學性質(zhì)主要受測量參數(shù)(針尖形狀和加載速率)和檢測位置的影響,而生物樣品異質(zhì)性強,如細胞核區(qū)和細胞質(zhì)區(qū)剛度差別很大,球形探針和細胞接觸面積大,大大減少了異質(zhì)性造成的誤差。另外研究發(fā)現(xiàn)錐形探針獲得的細胞楊氏模量大大高于鈍化針尖和球形探針,而鈍化針尖和球形探針之間無顯著差異。
2使用球形探針能夠更準確地估算針尖與樣品之間的接觸面積,從而可以利用更加準確的模型對力曲線進行擬合。每種探針采用的相應的模型:錐形探針采用Sneddon模型,球形探針采用Hertz模型。
3球形探針與細胞之間的接觸面積大,即使壓入深入大時也能夠避免對細胞的損傷,從而可以實現(xiàn)細胞膜下結構的力學性質(zhì)檢測。
4原子力顯微鏡的探針除了能夠作為力學表征工具,還能夠作為機械刺激工具研究細胞的力學響應性。而相比常規(guī)探針,較大的球形探針能夠更好的模擬細胞所處微環(huán)境的機械刺激,因此也更適用于細胞力學響應性研究中